摘要：通过血清三联筛查法和无创DNA检测法两种方法，开展唐氏综合征的产前筛查工作，比较两种方法的筛查效果。方法  2016年1月至2018年7月期间，将在本院进行产前检查的孕妇3083作为研究对象。根据孕妇对筛查方法的选择，分为血清组和无创DNA组。血清组孕妇采取血清三联筛查法筛查，无创DNA组孕妇行无创DNA检测，从筛查结果为高风险胎儿的几率、筛查结果的正确率、假阳性率和假阴性率几方面，对筛查效果进行比较；结果  无创DNA组筛查结果高风险的几率低于血清组，正确率高于血清组，假阳性率和假阴性率低于血清组，以上各项比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。结论  无创DNA检测法的筛查结果优于血清三联筛查法。

关键词： 唐氏综合症；产前筛查；血清三联筛查法；无创DNA检测法


唐氏综合症是第一个混合有精神发育迟滞的综合症之一，在我国新生儿中，发病率约为1/800～1/600。患儿具有典型的临床特征，如小指短小、手掌中有横纹、肢体松弛软弱和面部扁平等，随着患儿的生长，后期出现明显的智力和沟通障碍等[1-3]。由于受到当今医学发展的制约，尚无唐氏患者有效的治疗方法，相应的在孕妇产前，广泛开展唐氏胎儿的筛查工作，是降低唐氏患者比例最为有效的手段之一[4]。早期的筛查手段以血清学筛查为主，如血清三联筛查法等。随着检验医学技术的发展，无创DNA检测方法已经应用于临床。为了进一步体现以上两种筛查方法的优劣，现从筛查结果的正确性等角度，对两种筛查方法的效果进行分析，现报道如下。


1  资料与方法

1.1  临床资料  2016年1月至2018年7月期间，选择在本院进行产前检查的孕妇3083例作为研究对象。纳入标准：①均为单胎孕妇；②孕妇资料完整；③BMI测量结果在标准范围。排除标准：①多胎孕妇；②染色体异常孕妇；③唐氏疾病家族史。征得医院伦理委员会同意后，医务人员首先向孕妇介绍两种唐氏筛查的方法、价格、优势和注意事项后，根据孕妇个人的选择意愿，分为血清组和无创DNA组两组，每组孕妇各1726和1357例。在血清组中，孕妇年龄23～36岁，平均年龄（27.52±3.62）岁。孕周13～23周，平均孕周（18.50±2.55）周；在无创DNA组中，孕妇年龄23～35岁，平均年龄（27.30±4.06）岁。孕周14～22周，平均孕周（17.75±2.20）周；两组孕妇在年龄方面比较，差异无统计学意义。


1.2  筛查方法  血清组孕妇采取血清三联筛查法筛查。清晨空腹采静脉血5ml，检测内容包括检测甲胎蛋白（AFP）、游离人绒毛膜促性腺激素β亚单位（Free-β-HCG）和游离雌三醇（uE3），通过时间分辨免疫荧光法检测，试剂及试剂盒购自广州丰华生物公司。检测完成后，结合孕妇的年龄、孕周和体重等信息，应用Multical分析软件综合评估胎儿唐氏综合症的风险，设定1/270为罹患唐氏综合症高风险[5-6]。


无创DNA组行无创DNA检测。具体方法如下：任意时间取孕妇静脉血5ml，离心和分离血浆后提取DNA。然后在游离的DNA片段的末端增加接头，构建DNA文库和PCR扩展。应用Illunfina HiSeq 2000 测序平台进行测序分析，计算每条染色体上核酸片段的个数。通过生物信息学分析的方法计算Z值，若计算结果＞2，则判断胎儿为唐氏综合症高风险[7-8]。


1.3  观察标准  观察标准如下：①两种筛查方法的筛查结果为高风险胎儿的几率；②筛查结果的正确率、假阳性率和假阴性率比较。以羊膜腔穿刺检测结果和胎儿出生随访作为是否罹患唐氏综合症判定标准。其中正确率为实际罹患唐氏综合症同时筛查结果也为高风险的胎儿，与实际罹患唐氏综合症胎儿数量的比值。假阳性率为筛查结果为高风险但最终却并不是唐氏综合综的胎儿，与本组孕妇胎儿数量的比值。假阴性为筛查结果非高风险但实际结果为却是唐氏综合症的胎儿，与检测结果为高风险胎儿的比值。


1.4  统计学方法  采取SPSS20.0对结果进行分析，计数资料采用n（%）表示，组间比较行χ2检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。


2  结果

2.1  两种筛查方法的筛查结果为高风险胎儿的几率  血清组1726例孕妇采取血清三联筛查法筛查后，总计有121例胎儿筛查结果为高风险，高风险率为7.01%。无创DNA组1357例孕妇采取无创DNA筛查后，总计有6例胎儿筛查结果为高风险，高风险率为0.44%，2组比较，差异有统计学意义(χ2=82.983,P=0.000)。


2.2  筛查结果的正确率、假阳性率和假阴性率比较  通过羊膜腔穿刺检测结果和胎儿出生随访调查结果，得出在血清组中，最终有6例胎儿罹患唐氏综合症。其中2例胎儿与血清三联筛查法筛查结果一致，由此得出血清三联筛查法的正确率为33.33%。在无创DNA组中，有5例胎儿罹患唐氏综合症，均与筛查结果一致，筛查正确率为100.00%。两组比较，差异有统计学意义(c2=5.238，P=0.022）；在假阳性率方面，在血清组中，119例胎儿筛查结果为高风险却不是唐氏综合症胎儿，假阳性率为6.89%。在无创DNA组中，仅1例胎儿出现此情况，假阳性率为0.07%。两组比较，差异有统计学意义(c2=94.484，P=0.000）；在假阴性方面，在血清组，有4例筛查结果非高风险但实际结果为却是唐氏综合症的胎儿，假阴性率为66.67%。在无创DNA组，无此情况的患儿，假阴性率为0.00%。两组比较，差异有统计学意义(c2=5.238，P=0.022）。


3  讨论

唐氏综合症是临床上较为常见的一种疾病，在我国新生儿中，发病率约为1/800～1/600。其致病原因较为复杂，可能原因包括①年龄因素。如孕妇年龄越大，胎儿患病的几率越高；②遗传因素。经临床医学调查研究证实，约有10%唐氏综合症患儿是由遗传因素导致；另外孕妇的生活工作环境不佳，如长期接触放射线和农药等，也可增加胎儿的患病率。


近年来，为了有效降低唐氏综合综的发病率，唐氏筛查已经成为妇产科等科室的一项重点工作内容。早期的筛查方法主要以血清三联筛查法筛查为主，检测内容包括AFP、Free-β-HCG和uE3。其中AFP是胎儿的一种特异性球蛋白，其主要是作用的调节糖蛋白的免疫功能，预防胎儿与母体之间的相互排斥。一般情况下，若胎儿患有唐氏综合症，AFP检测结果为健康孕妇的70%左右；Free-β-HCG是胎盘细胞合成的人绒毛膜促性腺激素。Free-β-HCG的变化分为3个阶段，首先在孕8周前，Free-β-HCG快速增值，随后在孕18~20周前缓慢降低，最后保持稳定。但唐氏综合症胎儿的检测数值一直呈现上升状态[9-10]；uE3是胎儿胎盘产生的雌激素。唐氏综合症胎儿的肾上皮质发育不良，会影响uE3的合成，从而出现uE3降低的情况[11]。通过对三者的计算，结合孕妇的年龄、孕龄和体质量等因素，可以在一定程度上判断出胎儿患有唐氏综合综的危险。


无创DNA检测又称为无创胎儿染色体非整倍体检测等，其检测原理为在母体血浆中会含有胎儿游离DNA，当胎儿染色体出现变化或异常后，孕妇血液中DNA含量微量会随之发生变化。通过DNA测序等技术和生物信息分析后，可以较为准确的读取出这种变化情况，由此成为判断胎儿是否患有唐氏综合征的途径[12-14]。近年来，随着无创DNA检测技术的发展，已被全世界90余个国家采用。如以我国为例，每年行无创DNA检测的孕妇，已经超过100万。


正因为无创DNA直接对孕妇血液中游离的胎儿DNA进行检测，因此，无创DNA检测法的准确率明显高于血清三联筛查法，如以本次研究为例，无创DNA检测的的正确率、假阳性率和假阴性率均优于后者。但无创DNA也有其明显的弊端，即检测价格昂贵，成为限制无创DNA无法替代传统血清筛查法的主要瓶颈。因此，建议国家和各级卫生部门增加对孕妇产检的报销比例，以进一步降低唐氏综合症患儿的比例。


参考文献

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